2022年9月，艾码生物的创始人南京大学张辰宇教授及其团队在Nature Communications 发表了题为“In vivo self-assembled siRNA as a modality for combination therapy of ulcerative colitis”的论文，应用体内自组装siRNA的策略，突破了siRNA体内递送的瓶颈问题，从而在动物模型上实现了结肠炎的多靶点联合治疗，再次体现了艾码生物的技术平台在多基因致病疾病方面的潜在应用价值。

早在2021年3月29日，该团队在 Cell Research 发表了题为“In vivo self-assembled small RNAs as a new generation of RNAi therapeutics”的封面论文，首次提出并设计了一种可组合和可编程的基因环路，该环路能够重编程宿主肝脏，以指导siRNA在肝脏的自动合成和自组装进入外泌体，并通过外泌体的内分泌循环实现siRNA的体内递送，突破了一直以来siRNA的递送瓶颈，为临床转化应用奠定了技术基础。之后，在2021年12月，该团队在 Brain 发表了题为“Therapeutic reversal of Huntington’s disease by in vivo self-assembled siRNAs”的封面论文，通过构建靶向亨廷顿症致病基因mHTT的体内自组装siRNA，实现了对亨廷顿病动物模型的有效靶向中枢神经系统的治疗。

此次，是该团队第三次报道了体内自组装siRNA的递送系统，应用合成生物学的概念，从理论和实践结合的角度，根据其复杂的病理特征，通过在同一载体上串联表达，实现多种siRNA的同时生成，进而一次性靶向抑制多个致病基因，从而满足了全球发病率不断攀升，严重威胁着人类健康，累及回肠、直肠、结肠的这种特发性肠道炎症性疾病，包括溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）和克罗恩病（Chron’s disease，CD），因受遗传因素、免疫失调、微生物群失衡和环境因素影响，发病机制复杂、发病过程漫长、涉及因素众多，而亟待解决的多靶点联合治疗的需求，并且对结肠炎致病因素的多个环节加以控制，达到协同治疗的目的，突破了作用于单一致病基因或药物靶点，得不到很好的治疗效果，不能根治结肠炎的传统思路。

具体而言，该技术利用合成生物学设计理念，通过向小鼠静脉注射可同时表达TNF-α siRNA、B7-1 siRNA和integrin α4 siRNA的合成生物学基因环路（以质粒DNA的形式），将小鼠的肝脏重构成可以产生和分泌siRNA的器官，继而利用机体自身的外泌体分泌和传输途径，实现siRNA在体内稳定、高效、安全的生产和传输。利用该策略，该团队成功实现了对结肠炎的多个靶基因（TNF-α、B7-1和integrin α4）的同时干预，在结肠炎动物模型上显示了卓越的协同治疗作用，且治疗效果优于单独靶向TNF-α的英夫利昔单抗对照组。

体内自组装siRNA同时作用于多个靶点从而联合治疗结肠炎的模式图：CMV-siRT+B+I基因环路包含一个CMV启动子部分和一个siRNA串联表达框，这个串联表达框携带三个siRNA表达单元，可以同时驱动TNF-α siRNA、B7-1 siRNA和integrin α4 siRNA的转录；该基因环路通过尾静脉注射进入小鼠体内后，能被肝脏细胞吞噬，通过重编程宿主肝脏从而指导siRNA在肝脏的自动合成和向外泌体的自组装；进而，外泌体包裹的TNF-α siRNA通过外泌体内分泌循环，被递送至结肠巨噬细胞，通过抑制结肠巨噬细胞中TNF-α的表达，调控促炎反应以及调节免疫平衡；外泌体包裹的B7-1 siRNA能被抗原呈递细胞（APC）摄取，并抑制T细胞共刺激信号通路，促进T细胞耗竭；外泌体包裹的integrin α4 siRNA进入CD4+T细胞后，能够通过抑制整合素的生成阻断T细胞归巢至炎症部位。

此外，为了探讨该组件实现长期治疗的可能性，研究团队优化了组件载体，利用AAV8-TBG （肝特异性表达的AAV亚型及肝特异性启动子）搭载核心元件，实现TNF-α siRNA、B7-1 siRNA 和integrin α4 siRNA 在肠炎动物体内的长期表达。在慢性结肠炎模型中，该AAV8-TBG系统能够实现一次注射，持续治疗并缓解症状。

张辰宇教授团队通过在过去近十年的科研活动中，对体内自组装递送siRNA的平台技术在广谱治疗、靶向递送和多靶点基因调控方面的深入研究，证明了这一新型递送平台可在动态的体内环境中诱导可控的siRNA自组装和递送，并能够精确调控基因表达。艾码生物在具有丰富新药开发经验的团队的推动下，将该技术平台进行成果的产业化，开发各种siRNA药物，用于治疗免疫性疾病、代谢疾病、神经退行性疾病等目前临床需求尚未得到满足的疾病。目前，艾码生物的多个管线候选药物在临床前研究中均显示了较大的安全性和明显的治疗效果，有望快速进入临床试验阶段。